ESI BIO的使命是成為客戶信賴的合作伙伴，將科學(xué)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為診所。我們通過(guò)提供突破性的干細(xì)胞技術(shù)作為研究級(jí)和治療級(jí)產(chǎn)品來(lái)實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，從研究到診所的照明，以幫助我們的客戶實(shí)現(xiàn)他們治療疾病的目標(biāo)。

ESI BIO建立在豐富的創(chuàng)新和科學(xué)的基礎(chǔ)之上。我們于2000年在新加坡成立了ES Cell International，在那里我們通過(guò)制造個(gè)可翻譯的臨床級(jí)胚胎干細(xì)胞系來(lái)創(chuàng)建歷史，以便分發(fā)給研究界。

ESI BIO現(xiàn)在開(kāi)展業(yè)務(wù)Alameda CA. 我們是BioTime，Inc。擁有的以干細(xì)胞為基礎(chǔ)的子公司的驕傲家族的成員，我們從中受益于的科學(xué)，知識(shí)產(chǎn)權(quán)和干細(xì)胞技術(shù)的深層來(lái)源。

抗體

胚胎干細(xì)胞（ESCs）和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）的表征是干細(xì)胞研究中的關(guān)鍵步驟。驗(yàn)證起始細(xì)胞群的常規(guī)過(guò)程應(yīng)該簡(jiǎn)單，快速，重要的是可靠，以確保準(zhǔn)確和一致的結(jié)果。ESI BIO為您提供關(guān)鍵抗體形式和活體染色工具，這些工具專(zhuān)為干細(xì)胞直接開(kāi)發(fā)和測(cè)試而開(kāi)發(fā)。

快速而可靠的多能性驗(yàn)證
ESI BIO的BioLite™抗體可直接染色培養(yǎng)液中的活細(xì)胞，因此無(wú)需犧牲可用于下游實(shí)驗(yàn)的有價(jià)值物質(zhì)。

· 確認(rèn)多能性標(biāo)志物表達(dá)

· 允許在染色后繼續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)

· 低內(nèi)毒素，不含Sodium azide的配方

· 無(wú)需固定或透化，僅需孵育30分鐘

圖1. [A]小鼠ES細(xì)胞的IF分析。用BioLite SSEA-1（Dy-Light 488）抗體染色后培養(yǎng)細(xì)胞和相同視野的相差圖。[B] IF重組成人成纖維細(xì)胞第11天的原代iPS細(xì)胞集落的IF分析。用BioLite TRA-1-81（DyLight 488）抗體染色后培養(yǎng)細(xì)胞和相同視野的相差圖。以10X放大率拍攝圖像。

活細(xì)胞的免疫熒光染色方案  見(jiàn)附件

活細(xì)胞免疫熒光染色

描述

本協(xié)議描述了用BiLite™抗體直接免疫熒光(IF)染色活細(xì)胞的方法。所有的步驟都應(yīng)該在無(wú)菌的工作環(huán)境中進(jìn)行。 g新鮮培養(yǎng)基。請(qǐng)注意：

次使用一種抗體時(shí)，建議對(duì)抗體進(jìn)行滴定，以達(dá)到特定于細(xì)胞類(lèi)型的*性能。

·細(xì)胞可以在多孔板中直接生長(zhǎng)、處理和染色。·只需在生物安全柜中打開(kāi)抗體，以防止可能的污染。

·保護(hù)熒光共軛物不受光線照射。所需材料

所需設(shè)備

-BioLiteTM抗體(CAT)。否ST11006或貓。否ST11008)

37°C和5% CO2培養(yǎng)箱

細(xì)胞培養(yǎng)基

熒光顯微鏡

·多能干細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)協(xié)議

參考技術(shù)數(shù)據(jù)表中推薦的起始濃度，并滴定一次抗體，以獲得*的細(xì)胞類(lèi)型性能。

原抗體在新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基中稀釋至確定的*濃度

將培養(yǎng)液從細(xì)胞孔中吸出染色，直接將稀釋后的抗體加入活細(xì)胞的培養(yǎng)井中。

在37℃下用5%CO2孵化器孵育30分鐘。

吸出一次抗體，用新鮮培養(yǎng)基輕輕沖洗兩次。

向井內(nèi)加入新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基。

用熒光顯微鏡和適當(dāng)?shù)臑V鏡檢查細(xì)胞。

8.將細(xì)胞返回孵化器并繼續(xù)正常培養(yǎng)。

BioLite™ SSEA-1 (DyLight 488) anti-Human/Mouse Antibody, 100 µL 

通過(guò)免疫熒光染色檢測(cè)活的，未固定的多能干細(xì)胞群中的SSEA-1表達(dá)。

ST11006

BioLite™表面標(biāo)記允許對(duì)活的，未固定的多能干細(xì)胞群進(jìn)行直接免疫熒光染色?？贵w經(jīng)過(guò)細(xì)致的應(yīng)用測(cè)試和驗(yàn)證，以確保它們是無(wú)菌的，無(wú)毒的，不含Sodium azide，并且不含培養(yǎng)病原體。與未處理的細(xì)胞相比，用BioLite抗體染色的菌落能夠在培養(yǎng)中繼續(xù)，對(duì)增殖和分化潛能沒(méi)有不利影響。

背景技術(shù)階段特異性胚胎抗原-1（SSEA-1）是在早期小鼠胚胎，鼠胚胎癌（EC），鼠胚胎干（ES）和鼠和人胚（EG）細(xì)胞表面上表達(dá)的碳水化合物表位。未分化的人EC和ES細(xì)胞沒(méi)有明顯的免疫反應(yīng)性。人EC的分化導(dǎo)致SSEA-1表達(dá)的增加，而小鼠的表達(dá)減少。SSEA-1與細(xì)胞粘附，遷移和分化有關(guān)。

濃度 0.5毫克/毫升

物種反應(yīng)性 人類(lèi)，老鼠

主辦 小鼠單克隆

克隆 MC-480

同型 IgM，κ

免疫原 F9四角癌干細(xì)胞（X射線照射）

公式 0.2μm過(guò)濾滅菌的磷酸鹽緩沖溶液，pH 7.2，不含防腐劑。通過(guò)LAL測(cè)試確定，內(nèi)毒素水平<0.1EU /μg蛋白質(zhì)（<0.01ng /μg蛋白質(zhì)）。配方不含細(xì)菌，真菌和支原體。

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性 儲(chǔ)存在2-8°C避光。根據(jù)指示存放，自收到之日起6個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。

BioLite格式不含防腐劑，因此必須在無(wú)菌條件下處理。

應(yīng)用程序測(cè)試 對(duì)活的，未固定的小鼠ES細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光（IF）

推薦的稀釋液 免疫熒光1：100

流式細(xì)胞儀1：100

建議針對(duì)每種應(yīng)用滴定抗體以獲得*性能。

替代名稱 CD15，階段特異性胚胎抗原1

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

1：強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。

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