描述
一種可以分離/純化存在于革蘭氏陰性菌外壁上的LPS的產(chǎn)品
• 革蘭氏陰性菌中LPS的分離/純化
• 酚水法提取LPS
• 有效去除蛋白質(zhì)和核酸等污染物
• 高效、簡單的LPS萃取產(chǎn)品
•提取LPS的整個(gè)過程在長達(dá)60分鐘內(nèi)完成
LPS提取試劑盒是一種可以分離/純化存在于革蘭氏陰性細(xì)菌外細(xì)胞壁上的LPS的產(chǎn)品。一般來說，革蘭氏陰性細(xì)菌除了在細(xì)胞包膜外層中的磷脂和蛋白質(zhì)外，還具有稱為脂多糖（LPS）的單獨(dú)結(jié)構(gòu)，并且每種細(xì)菌具有不同的特征。已知這種LPS在細(xì)菌生長和存活中起重要作用，特別是在宿主和寄生蟲之間的相互作用中。此外，LPS被認(rèn)為與免疫反應(yīng)密切相關(guān)，例如在應(yīng)用膿毒性休克時(shí)通過分泌內(nèi)毒素引起外周血管塌陷，并且對于毒性病理生理學(xué)反應(yīng)也很重要。每種細(xì)菌的LPS提取模式是不同的，通過這種方式，細(xì)菌被系統(tǒng)地分離。如前所述，細(xì)菌內(nèi)毒素通常存在于革蘭氏陰性細(xì)菌的外壁上，并且在細(xì)菌活著時(shí)不表達(dá)，而是在細(xì)菌增殖或死亡時(shí)通過破壞細(xì)胞壁釋放到外部。天然內(nèi)毒素由LPS，蛋白質(zhì)和磷脂組成。它本質(zhì)上非常穩(wěn)定，耐熱，帶負(fù)電，分子量大（超過1，000，000道爾頓）。通常，用Trichloroacetic acid，丁醇或EDTA提取蛋白質(zhì)以除去脂質(zhì)相關(guān)蛋白質(zhì)（LAP），并使用苯酚提取磷脂。通常，如果您嘗試提取LPS，則可以獲得每個(gè)細(xì)菌干重約1-4%的LPS。由于LPS提取試劑盒基于苯酚水法，因此它使細(xì)胞毒素中的蛋白質(zhì)變性，并通過以水層和苯酚層之間的沉淀物形式使其變性來除去它。由于脂質(zhì)由苯酚/氯仿級分分離，因此只能快速輕松地提取高LPS。
應(yīng)用
01 液化石油氣的組成和結(jié)構(gòu)研究
02 細(xì)菌的系統(tǒng)發(fā)育研究
03 抗生素靶點(diǎn)研究
04 LPS抑制藥物設(shè)計(jì)研究
05 碳水化合物抗原免疫反應(yīng)研究
套件內(nèi)容
裂解緩沖液 100 毫升 x 1 歐元
純化緩沖液 80 毫升 x 1 歐元
技術(shù)參數(shù)
低磷脂提取的產(chǎn)量
應(yīng)變液化石油酸產(chǎn)量（微克）蛋白質(zhì)污染*
鼠傷寒沙門氏菌 200 ~ 400 < 0.2微克
腸炎鏈球菌 90 ~ 250 < 0.2微克
鱗毛蕨 150 ~ 450 < 0.2微克
大腸桿菌（野生型） 220 ~ 490 < 0.2微克
大腸桿菌 （O：055） 260 ~ 510 < 0.2微克
大腸桿菌 （O：111） 220 ~ 500 < 0.2微克
大腸桿菌 （O：1） 180 ~ 380 < 0.2微克
大腸桿菌 （O：2） 180 ~ 380 < 0.2微克
使用LPS提取試劑盒從OD600的每個(gè)G（-）菌株中提取LPS后，使用Purpald測定法對提取的LPS進(jìn)行定量，結(jié)果證實(shí)了上述提取效率。另一方面，使用我們的SMART微BCA測定試劑盒觀察到蛋白質(zhì)的存在，并確認(rèn)污染小于0.2μg。
從各種菌株中提取的LPS的條帶圖案
泳1 ：鼠傷寒沙門氏菌 2 ： 腸炎
南道 3 ： 大腸桿菌 （O055） 泳4 ： 大腸桿菌 （O111）
泳道 5 ： 南鎵草泳道 6 ： S. 腸炎
泳7 ： 鼠傷寒沙門氏菌 泳8 ： 大腸桿菌 （野生大腸桿菌）
泳9 ： 大腸桿菌 （O111） 泳道 10 ： 大腸桿菌 （O2）
由于從各種類型的革蘭氏陰性細(xì)菌中提取LPS的SDS-PAGE后銀染色，根據(jù)作為多聚體存在的LPS的特征和多聚體的數(shù)量，觀察到梯形圖形式的條帶圖案。觀察到模式存在差異。
產(chǎn)品詳情
名稱 LPS Extraction Kit
編號 17141
品牌 intronbio
