Lucerna, Inc. 是一家生物技術(shù)工具公司，專注于開發(fā)和商業(yè)化熒光適體 (Spinach™) 技術(shù)，其目的是：1.) 提供即插即用的 RNA 成像和檢測系統(tǒng)作為研究試劑，2.) 開發(fā)高- 通量篩選平臺，以實(shí)現(xiàn)以前難以處理的目標(biāo)的新藥物發(fā)現(xiàn)，以及 3.) 開發(fā)用于工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用的熒光傳感器。
Lucerna 由康奈爾大學(xué)科學(xué)家創(chuàng)立，他們是 Spinach™ 技術(shù)的發(fā)明者，并已發(fā)表了 20 多篇關(guān)于該技術(shù)的文章。創(chuàng)始團(tuán)隊(duì)在 RNA 生物學(xué)、適體開發(fā)、化學(xué)生物學(xué)和熒光成像領(lǐng)域展示了專業(yè)知識。此外，Lucerna 科學(xué)家在 RNA 生物學(xué)、熒光成像、高通量篩選和檢測開發(fā)方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn)。
Lucerna BI說明書
(Z)-3-((1H-benzo[d]imadazol-4-yl)methyl)-5-(3,5-difluoro-4-hydroxybenzlidene)-2-methyl-3,5-dihydro-4H-imidazol -4-一 (BI)
分子式：
C 19 H 14 F 2 N 4 O 2
分子量：
368.3
CAS 名稱/編號：
Broccoli TM /BI 在 pH 7.4 緩沖液中的吸收和熒光發(fā)射光譜。
演示： 凍干染料
質(zhì)量保證：產(chǎn)品通過1 H NMR 和 LC-MS進(jìn)行分析， 并通過 HPLC 提供純度 >98%。
使用聲明：本產(chǎn)品僅供研究使用，不得用于任何其他目的，包括但不限于未經(jīng)授權(quán)的商業(yè)用途、體外診斷用途、離體或體內(nèi)治療用途或任何類型的食用或應(yīng)用于人類或動(dòng)物。由于熒光團(tuán)和適體的高度特異性，我們無法預(yù)測 Lucerna TM 產(chǎn)品在其客戶系統(tǒng)中的表現(xiàn)，也無法對其負(fù)責(zé)。使用 Lucerna TM 產(chǎn)品的研究人員應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化研究，以實(shí)現(xiàn)其預(yù)期應(yīng)用的最佳結(jié)果。
圖 1.表達(dá) β-肌動(dòng)蛋白 mRNA 轉(zhuǎn)錄物的 COS7 細(xì)胞的活細(xì)胞成像，在 3'UTR 中標(biāo)記有 24 個(gè) Broccoli TM拷貝。將細(xì)胞與 0.5 µg/ml Hoechst 33342 染色劑（藍(lán)色）和 10 µM BI（綠色）一起孵育，并使用 500 毫秒曝光和 GFP 過濾器組獲取圖像。僅當(dāng)用 BI 處理表達(dá)西蘭花的細(xì)胞時(shí)才觀察到移動(dòng)熒光點(diǎn)。
圖 2.對于單分子成像，COS7 細(xì)胞用表達(dá) mCherry-24xBroccoli TM轉(zhuǎn)錄物的構(gòu)建體轉(zhuǎn)染，并在 10 µM BI 存在下成像。使用 TRITC 和 GFP 過濾器組獲取相同細(xì)胞的圖像以捕獲 mCherry 熒光（紅色）和 Broccoli TM（綠色）信號。在表達(dá) mCherry 的細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均檢測到移動(dòng)熒光點(diǎn)。
圖 3.使用表達(dá)A. MS2-GFP 系統(tǒng)和B. Broccoli TM -BI 系統(tǒng)的COS7 細(xì)胞對活的熒光 mRNA 點(diǎn)進(jìn)行成像。Broccoil 標(biāo)記的 mRNA 的點(diǎn)大小與 MS 標(biāo)記的 mRNA 的點(diǎn)大小相似。此外，從兩個(gè)系統(tǒng)標(biāo)記的 mRNA 的點(diǎn)強(qiáng)度表現(xiàn)出單一的高斯分布，與這些點(diǎn)中的大多數(shù)反映單個(gè) mRNA 轉(zhuǎn)錄本一致。比例尺均為 5 µm。
熒光團(tuán)促進(jìn)的 RNA 折疊和光穩(wěn)定性使活哺乳動(dòng)物細(xì)胞中單個(gè)西蘭花標(biāo)記的 mRNA 成像成為可能。Li X、Kim HY、Litke JL、Wu JH、Jaffrey SR。 Angew Chem Int Ed . 2020 年 3 月 9 日；59(11)：4511-4518。
