上海起發(fā)haemtech HCPC-0070說(shuō)明書
Protein C
蛋白C的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)代表蛋白C的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)，其中：GLA =包含γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域，EGF =包含與人表皮生長(zhǎng)因子同源的序列的區(qū)域，AP =在酶原轉(zhuǎn)化為糖原后釋放的活化肽?；钚越z氨酸蛋白酶，CATALYTIC DOMAIN =包含絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。箭頭指示在酶原激活期間被凝血酶蛋白水解切割的位點(diǎn)。
| 尺寸 | 100微克 |
|---|---|
| 公式 | 50％甘油/水（v / v） |
| 存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
|---|---|
| 純度 | 通過(guò)SDS-PAGE，> 95％ |
| 活性測(cè)定 | 顯色分析<0.5％aPC活性 |
|---|---|
| 保質(zhì)期（正確存放） | 12個(gè)月 |
| 尺寸 | 100微克 |
|---|---|
| 公式 | 50％甘油/水（v / v） |
| 存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
|---|---|
| 純度 | 通過(guò)SDS-PAGE，> 95％ |
| 活性測(cè)定 | 顯色分析<0.5％aPC活性 |
|---|---|
| 保質(zhì)期（正確存放） | 12個(gè)月 |
依賴維生素K的酶原（蛋白C）在肝臟中合成為單鏈多肽，隨后通過(guò)從前體分子（1）中去除二肽（Lys-146和Arg-147）轉(zhuǎn)化為二硫鍵連接的異二聚體。 ，2）。在血漿中已觀察到痕量的單鏈形式。輕鏈負(fù)責(zé)鈣蛋白C與磷脂囊泡的鈣依賴性結(jié)合，包含11個(gè)γ-羧基谷氨酸（gla）殘基，1個(gè)b-羥基天冬氨酸殘基和2個(gè)表皮生長(zhǎng)因子（EGF）同源域。絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體位于重鏈中。人蛋白C易于從重鏈的COOH末端進(jìn)行蛋白水解切割多肽（Mr = 3000），產(chǎn)生稱為β蛋白C的改變形式。沒有觀察到α蛋白和β蛋白C之間的功能區(qū)別。人蛋白C重鏈的Arg-12（牛中的Arg-14）的單次切割將酶原轉(zhuǎn)化為絲氨酸蛋白酶，即活化的蛋白C。這種切割是由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面之間的復(fù)合物催化的蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白。與其他依賴維生素K的凝血因子相反，活化的蛋白C通過(guò)催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而充當(dāng)抗凝劑。APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖溶反應(yīng)。α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物可催化這種裂解。與其他依賴維生素K的凝血因子相反，活化的蛋白C通過(guò)催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而充當(dāng)抗凝劑。APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖溶反應(yīng)。α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物可催化這種裂解。與其他依賴維生素K的凝血因子相反，活化的蛋白C通過(guò)催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而充當(dāng)抗凝劑。APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖溶反應(yīng)。
牛蛋白C是通過(guò)修改Walker程序（3），從新鮮的檸檬酸牛血漿中制備的，如Haley等人所述。（4）。使用免疫親和層析（5）和常規(guī)技術(shù)（4,9）的組合，從新鮮的冷凍檸檬酸人血漿中制備人C蛋白。蛋白C以50％（體積/體積）甘油/水的形式提供，應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過(guò)SDS-PAGE分析確定純度，并使用基于生色底物的測(cè)定法測(cè)量活性。
| 加載 | 人類蛋白C，每泳道1 µg |
|---|---|
| 緩沖 | 拖把 |
| 標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa） |
| 本土化 | 等離子體 | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 血漿濃度 | 4-5 µg / ml（人）（6） 5-10 µg / ml（牛）（2） | ||||||||
| 行動(dòng)方式 | Zymogen; 絲氨酸蛋白酶激活蛋白C（APC）的前體 | ||||||||
| 分子量 | 62,000（人類）（7） 58,000（牛）（7） | ||||||||
| 消光系數(shù) |
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| 等電點(diǎn) | 4.4-4.8（人）（8） 4.2-4.5（牛）（8） | ||||||||
| 結(jié)構(gòu)體 | 兩條鏈，Mr = 41,000和21,000，二硫鍵連接，NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域，兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域 | ||||||||
| 碳水化合物百分比 | 23％（人類）（7） 14％（牛）（7） | ||||||||
| 翻譯后修飾 | 11個(gè)gla殘基（牛），9個(gè)gla殘基（人），1個(gè)β-羥基天冬氨酸 |
