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Smart Tube PROT1解凍樣品的解凍方案

 更新時(shí)間:2018-12-06 點(diǎn)擊量:2182

 

 

smarttubePROT1解凍樣品的解凍方案

 

加利福尼亞州Smart Tube

 

PROT1, 100 Test

 

一瓶蛋白質(zhì)組穩(wěn)定劑。體積足以穩(wěn)定一百五十五毫升全血樣本。還包括解凍在穩(wěn)定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X Concentrate”。 

 

所需緩沖區(qū):

 

1倍水樣(用蒸餾水稀釋1000倍濃縮液,使工作濃度達(dá)到1倍)。

 

緩沖器應(yīng)在室溫下

 

染色緩沖液磷酸鹽緩沖液0.5%牛血清白蛋白)緩沖液應(yīng)在4℃

 

可能需要的其他緩沖區(qū):

 

1倍緩沖液2(用蒸餾水稀釋5倍濃縮液,使工作濃度達(dá)到1倍)。緩沖器應(yīng)在室溫下。

 

禮儀:

 

如果樣品沒(méi)有凍結(jié),因?yàn)榉治鰧⒃谕惶爝M(jìn)行,請(qǐng)繼續(xù)進(jìn)行第二步。在冷水浴(10°C至15°C)中用攪拌水(即.=‘class 1’>)解凍冷凍樣品.旋轉(zhuǎn)磁性 攪拌棒或使用軌道震動(dòng)器)大約20分鐘,直到樣品*解凍。另一種方法是,在4°C冰箱的開(kāi)式機(jī)架中解凍管子大約30分鐘,直到 樣品是*解凍的,不要使用泡沫塑料機(jī)架來(lái)保存樣品,因?yàn)闃悠芬獜?80°C快速過(guò)渡到*解凍狀態(tài)是很重要的。一旦樣品迅速解凍,m 敬下一步。

 

加入1倍的SAW-Lyse緩沖液,比例為4:1的穩(wěn)定樣品(即。如果原始樣本為全血1ml,則加入1.4ml穩(wěn)定劑,總體積為2.4m 在穩(wěn)定后,加入至少9.6ml的1xThaw-Lyse緩沖液。將樣品在室溫下攪拌10分鐘。

 

600×g離心,室溫下離心5分鐘,取白細(xì)胞。扔掉上清液。

 

  1. 將球團(tuán)置于25 ml的1倍Saw-Lyse緩沖液中,室溫下孵育10分鐘。在室溫下,以600×g離心5分鐘。丟棄上清液。 如果球團(tuán)是相對(duì)白色的,紅細(xì)胞溶解是*的。

 

紅細(xì)胞溶解完成后,樣品再懸浮在染色介質(zhì)中,轉(zhuǎn)移到FACS管或板上,用染色介質(zhì)沖洗。將樣品按600 x g離心5次 幾分鐘?,F(xiàn)在可以像用多聚甲醛固定的白細(xì)胞一樣對(duì)樣品進(jìn)行染色,使用固定細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)染色規(guī)程。注意進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)染色 細(xì)胞必須用酒精滲透。90%甲醇)或洗滌劑(即。0.2%的皂甙)作為智能管道系統(tǒng),就像傳統(tǒng)的固定方法一樣,產(chǎn)生細(xì)胞膜為s的細(xì)胞 可滲透于小分子染料,如碘化丙酸丙酯,但在其他方面是完整的,不提供適當(dāng)?shù)目贵w進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部,而不經(jīng)alc進(jìn)一步滲透。 酒精或洗滌劑。

 

Lotus公司出品的群件系列軟件

 

建議在一項(xiàng)研究中對(duì)用于解凍樣品的條件(水浴溫度、攪拌和持續(xù)時(shí)間)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。

 

完整的紅細(xì)胞溶解通常是在步驟4之后實(shí)現(xiàn)的。室溫下穩(wěn)定時(shí)間較長(zhǎng)或樣品在4°C(或更高溫度)保溫時(shí)間較長(zhǎng) 皺縮可能會(huì)使紅細(xì)胞溶解更加困難。

 

如果紅細(xì)胞溶解在步驟4后未完成,請(qǐng)執(zhí)行以下步驟:

 

A1.將球粒置于大于15 ml的1xLyse緩沖液中,在室溫下孵育10分鐘,與原藥丸相同,丟棄上清液。如果球團(tuán)是白色的,表示紅細(xì)胞溶解。 完成后,繼續(xù)上面的步驟5。如果沒(méi)有,請(qǐng)繼續(xù)下面的步驟A2。

 

A2.將球團(tuán)置于大于15 ml的1倍Saw-Lyse緩沖液中,在室溫下孵育10分鐘,與以前相同,丟棄上清液。球團(tuán)應(yīng)該是相對(duì)白色的,表示紅細(xì)胞溶解。 S是完整的。繼續(xù)執(zhí)行上面的第5步。

 

 

 

目錄編號(hào)

新零件號(hào)

老零件號(hào)

產(chǎn)品名稱

描述

 

 

 

 

 

PBS05

501351688

NC0334362

智能管基站,標(biāo)準(zhǔn)型號(hào)

使用多達(dá)5個(gè)智能管自動(dòng)化溫度控制孵育和隨后的全血穩(wěn)定,用于表面表位,磷酸表位,細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子,細(xì)胞周期,其他測(cè)定的下游單細(xì)胞分析。

 

 

 

 

 

PROGRAM1P

501351695

NC1228060

智能管基站編程站

編程站是一個(gè)手持設(shè)備,帶有LCD屏幕和鍵盤(pán)以及簡(jiǎn)單的用戶界面,用于創(chuàng)建由基站執(zhí)行的實(shí)驗(yàn)協(xié)議(型號(hào)PBS05PBS05-M1V-BSM1)。實(shí)驗(yàn)協(xié)議存儲(chǔ)在類似于拇指驅(qū)動(dòng)器的編程密鑰中。包括一個(gè)編程密鑰。將編程密鑰插入基站并打開(kāi)電源會(huì)將存儲(chǔ)在編程密鑰上的協(xié)議復(fù)制到基站。

 

 

 

 

 

MTS1P 100 / CS

501351690

NC0618265

智能管,100

標(biāo)準(zhǔn)智能管,一百個(gè)案例。優(yōu)化使用1毫升全血。包括THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X濃縮物,解凍后儲(chǔ)存在Smart Tubes中冷凍的樣品。還包括用于處理解凍樣品的SERT1“一袋一百(100)個(gè)處理插件。查詢優(yōu)化的智能管與其他樣品量以及預(yù)先裝載生物制劑或感興趣藥物的智能管一起使用。

 

 

 

 

 

PROT1

501351689

NC0500838

Proteomic Stabilizer PROT1,大小:100個(gè)測(cè)試

一瓶蛋白質(zhì)組穩(wěn)定劑。體積足以穩(wěn)定一百五十五毫升全血樣本。還包括解凍在穩(wěn)定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse1000X Concentrate”。

 

 

 

 

 

PROT1-250ML

501351692

NC0627333

Proteomic Stabilizer PROT1,大?。?/span>250毫升

250毫升的Proteomic Stabilizer PROT1瓶。當(dāng)按照建議使用時(shí),足以穩(wěn)定超過(guò)170毫升的全血。還包括解凍在穩(wěn)定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse1000X Concentrate”。

 

 

 

 

 

PROT1-1L

501351691

NC0618275

Proteomic Stabilizer PROT1,大小:1

1升一瓶Proteomic Stabilizer PROT1。當(dāng)按照建議使用時(shí),足以穩(wěn)定超過(guò)700毫升的全血。還包括解凍在穩(wěn)定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse1000X Concentrate”。

 

 

 

 

 

STBLYSE2-250

501351694

NC1028711

Stable-Lyse V2緩沖液,大小:250毫升

250毫升Stable-Lyse V2緩沖液瓶。該緩沖液與Stable-Store V2緩沖液結(jié)合使用,可存儲(chǔ)全血樣品,在4攝氏度下臨時(shí)存儲(chǔ),在-80攝氏度下長(zhǎng)期存放。每250微升全血使用350微升。不得與標(biāo)準(zhǔn)智能管或PROT1蛋白質(zhì)組穩(wěn)定劑一起使用。

 

 

 

 

 

STBLSTORE2-250

 

NC1409327

穩(wěn)定存儲(chǔ)V2緩沖液,大?。?/span>250毫升

250ml瓶裝Stable-Store V2緩沖液。該緩沖液與Stable-Lyse V2緩沖液結(jié)合使用,可將全血樣品保存在4攝氏度的臨時(shí)儲(chǔ)存中,并在-80攝氏度下長(zhǎng)期保存。

 

 

 

 

 

STBLSTORE2-1000

501351693

NC1028710

穩(wěn)定存儲(chǔ)V2緩沖液,大?。?/span>1000毫升

1000ml瓶裝Stable-Store V2緩沖液。該緩沖液與Stable-Lyse V2緩沖液結(jié)合使用,可將全血樣品保存在4攝氏度的臨時(shí)儲(chǔ)存中,并在-80攝氏度下長(zhǎng)期保存。每250微升全血使用1000微升。不得與標(biāo)準(zhǔn)智能管或PROT1蛋白質(zhì)組穩(wěn)定劑一起使用。

 

 

 

 

 

THAWLYSE1

501351696

NC1255073

Thaw-Lyse,1000X濃縮液,60毫升

60毫升Thaw-Lyse緩沖液,1000倍濃縮液。解凍凍結(jié)在PROT1Smart Tubes中的樣品后使用解凍 - 裂解緩沖液。Thaw-Lyse緩沖液溶解先前在PROT1Smart Tubes中冷凍的樣品中的紅細(xì)胞。該緩沖液以1000倍濃縮液的形式提供。

 

 

 

 

 

LYSE2

501351697

NC1255074

裂解緩沖液2,5X濃縮物,500毫升

當(dāng)處理預(yù)先在PROT1Smart Tubes中冷凍的全血樣品時(shí),裂解緩沖液2用于任選的第二紅細(xì)胞裂解步驟。除非穩(wěn)定反應(yīng)時(shí)間或溫度偏離標(biāo)準(zhǔn)方案,否則典型的全血樣品不需要該緩沖液。

 

 

 

 

 

SERT1

501351698

NC1255075

加工插件,100

一袋一百(100)個(gè)處理插頁(yè)。處理插入物在解凍先前在智能管中冷凍的樣品后使用。處理插入物用于從智能管中潷析血液樣本。

 

 

 

 

 

MTS1PTRAY1

 

 

用于存放智能管的托盤(pán)

嵌套熱塑性托盤(pán)用于智能管的冷凍庫(kù)存。

 

 

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